離子交換色譜柱主要是基于離子交換樹脂上的離子與樣品中的離子之間的可逆交換作用。離子交換樹脂是一種具有離子交換功能的高分子化合物,其分子中含有可離解的離子基團(tuán),如磺酸基、羧酸基等酸性基團(tuán)或季胺基等堿性基團(tuán)。這些離子基團(tuán)可以與溶液中的離子發(fā)生交換,從而實(shí)現(xiàn)樣品的分離和純化。離子交換色譜柱的制備流程:
樣品制備:樣品通常是液體溶液,需要準(zhǔn)備好待測物質(zhì)的樣品,并將其溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲小?/span>
樣品加載:將待測物樣品通過進(jìn)樣口加載到離子交換色譜柱中。為了保持色譜柱的穩(wěn)定性和延長使用壽命,通常需要通過前處理將樣品中的顆粒物質(zhì)或雜質(zhì)去除。
柱平衡:用適當(dāng)?shù)木彌_液或移液進(jìn)行柱平衡,以確保樣品中的離子與離子交換樹脂上的對應(yīng)離子達(dá)到平衡,從而實(shí)現(xiàn)離子的吸附和解吸。
柱洗脫:根據(jù)特定的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模陔x子交換平衡條件下,通過洗脫溶液改變離子交換樹脂上的溶質(zhì)吸附狀態(tài),從而實(shí)現(xiàn)離子的分離。不同的洗脫溶液可以用于洗脫不同的離子。
柱再生:在洗脫結(jié)束后,通過使用再生緩沖液將離子交換樹脂上的離子去除,實(shí)現(xiàn)柱的再生。